מבוא מוצר
|
שם המוצר |
חתול מס. |
מפרט |
|
DNase I רקומביננטי (ללא RNase) |
G3342-500U |
500U |
תיאור המוצר/מבוא
DNase I הוא אנדונוקלאז המעביר הידרוליזה של קישורי פוספודיאסטר ויוצרים אוליגונוקלאוטידים עם 5'-פוספט וקבוצת 3'-הידרוקסיל. DNase I תלוי בסידן וניתן להפעילו על ידי יוני מגנזיום ומנגן דו ערכי. בנוכחות יון מגנזיום, DNase I יכול לחבר באופן אקראי כל אתר של DNA דו-גדילי. בנוכחות יוני מנגן דו ערכיים, DNase I יכול לחבר גדילי DNA כפולים באותו אתר, ליצור קצוות קהים או קצוות דביקים עם 1 או 2 נוקלאוטידים.
יישומים
1. הכנת דגימות RNA ללא DNA;
2. להשמיד DNA גנומי בתכשירי RNA לפני שעתוק הפוך-PCR (RT-PCR).
3. במבחנה T7, T3, SP6 ופולימראזות RNA אחרות מזרזות את הסרת תבניות ה-DNA במערכת ה-RNA שלאחר השעתוק;
4. Nick translationin סמני DNA;
5. יצירת ספריות של שברי DNA אקראיים;
6. זיהוי אפופטוזיס Tunel של שחבור חלקי של DNA גנומי כשליטה חיובית.
מאפיינים: מפרק DNA באופן ספציפי, אך אינו יכול לפרק RNA.
מקור: ביטוי רקומביננטי של זן פיצ'יה קולי המכיל את הגן Bovine Pancreatic DNase I.
הגדרה של פעילות האנזים: יחידה אחת היא כמות האנזים הדרושה לפירוק מוחלט של 1 מיקרוגרם DNA וקטור pBR322 ב-10 דקות ב-37 מעלות.
אינאקטיבציה או עיכוב: דגירה של 10-דקות ב-75 מעלות להשבתה מלאה של DNase I.
טוהר: גדול או שווה ל-95% לפי SDS-PAGE, ללא RNase; 10 U/uL.
תנאי אחסון ומשלוח
ספינה עם קרח רטוב; חנות בתואר -20 תקפה למשך 12 חודשים.
תכולת המוצר
|
רְכִיב |
G3342-500U |
|
DNase I רקומביננטי (ללא RNase) |
50 μL |
|
10×DNase I Reaction Buffer |
1 מ"ל |
|
25 מ"מ EDTA |
1 מ"ל |
פרוטוקול בדיקה / נהלים
שימוש התייחסות (למשל הכנת דגימות RNA ללא DNA)
א. הוסף את הרכיב הבא לשפופרת סטרילית נטולת נוקלאז על קרח בסדר המצוין, ערבב בעדינות וצנטריפוגה קצרות.
|
רְכִיב |
סְכוּם |
|
RNA |
1 אג' |
|
DNase I רקומביננטי (ללא RNase) |
1 U |
|
10×DNase I Reaction Buffer |
1 μL |
|
מים ללא RNase |
עד 10 μL |
1. דגירה ב-37 מעלות למשך 30 דקות.
2. הוסף 0.5 μL של 25 mM EDTA כדי לעצור את התגובה;
3. DNase I הושבתה לחלוטין לאחר דגירה ב-75 מעלות למשך 10 דקות.
פֶּתֶק
1. בעת השימוש במוצר, האנזים צריך להיות על קרח ולאחסן מיד לאחר השימוש ב--20ºC.
1. למען הבטיחות והבריאות שלך, נא ללבוש משקפי בטיחות, כפפות או ביגוד מגן.
לשימוש מחקר בלבד!
תגיות פופולריות: recombinant dnase i (ללא rnase), יצרנים, ספקים, מפעל רקומביננטי dnase i (ללא rnase)
